Inactivación de una peroxidasa comercial por peróxido de hidrógeno

Resumen

El objetivo del presente trabajo fue evaluar la estabilidad de una peroxidasa comercial (HRP) en condiciones de reacción. Espectrofotométricamente se pudieron identificar tres estados de la enzima. En ausencia de peróxido (P), la enzima está en su estado basal (E0). Aunque la literatura indica que en presencia de P el estado basal E0 se oxida a un estado E1 perdiendo dos electrones, solo se observó el estado intermedio E2, el cual está un electrón debajo de E0. En presencia altas concentraciones de P se identificó una tercera especie E3, la cual decae a E0. Además, la HRP pudo catalizar la descomposición del peróxido, evidenciando la actividad catalásica de la HRP. El decaimiento de E3 también generó una especie Ex, la cual resultó catalíticamente inactiva. Asimismo, la formación de la especie inactiva se correlacionó con la pérdida de actividad peroxidasa. Experimentos similares en presencia de OII como sustrato reductor externo, empleando bajas concentraciones de P y tiempos cortos, muestran también una disminución de la actividad peroxidasa. Considerando que en estas condiciones la formación de E3 es despreciable, los resultados sugieren una ruta alternativa de inactivación, independiente de la formación de E3. Por lo tanto, se concluye que en las condiciones estudiadas la pérdida de actividad enzimática es una característica intrínseca de la HRP estudiada.